病毒保存液在新冠病毒核酸检测流程中的作用
目前,新型冠状病毒感染的常规检测方法为核酸测定(实时荧光RT-PCR方法),核酸检测是确诊新冠肺炎的金标准。核酸检测的结果是新冠肺炎患者临床确诊和康复出院的重要证据,那么这一结果经过实名流程呢?病毒灭活保存液又在其中发挥着怎样的作用呢?
因为新冠病毒其强大的传染性和特异性,核酸检测过程危险无比。根据国家卫健委发布的《新型冠状病毒感染的肺炎实验室检测技术指南》(第二版),任何新型冠状病毒的检测都必须在具备适当条件的实验室由经过相关技术安全培训的人员进行操作。
新冠病毒核酸检测流程:
第一步:接受样本
核酸检测是样本送检后,从检测人员接收样本开始的。在接受样本前,检测人员需要按照三级防护标准穿戴好,穿着防护衣、护目镜、隔离衣,并戴上N95口罩,双层手套,套上脚套等。
然后用75%的乙醇对实验室内的生物安全柜的空间和台面以及核酸提取仪等进行消毒,还需对标本转运箱进行消毒,并核对被检样本姓名、性别、年龄、编号及检测项目等,待确认转运箱完好后将其放入生物安全柜。
第二步:病毒灭活
病毒灭活是很重要的一步,通常采用56°水浴灭活,时长30分钟左右,这一过程可使病毒性减弱,大大降低了操作人员的感染风险,而且不会影响检测结果。病毒灭活后为避免开盖后气溶胶污染实验室和检测人员,还需要常温静置一段时间。
第三步:核酸提取
核酸提取是所有步骤里面危险系数大的一步,需要在负压实验室的生物安全柜内小心翼翼地打开样本。然后加入核酸提取试剂,把病毒细胞破坏,让核酸释放出来。
第四步:核酸分析,等待结果
在生物安全柜内,将提取的核酸加到PCR扩增反应体系,然后将构建的扩增体系放入扩增仪,进行核酸分析。
第五步:消毒,废物处理
一系列步骤完成后,需要对实验废物进行处理,并对实验仪器、桌面、地面进行消毒。
以上检测步骤危险度大的就是核酸提取,因为新冠病毒感染性强,传播途径多。针对这个问题有什么办法可以解决呢?病毒灭活型保存液很好的解决了这一困难。病毒灭活保存液采用裂解盐可以快速对呼吸道病原体进行灭活,保存,使样品失去感染性。由于是灭活病毒而不用给培养病毒,首先需要的就是对病毒进行裂解失活、破坏其膜蛋白释放核酸,大大降低了核酸提取的危险度。
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